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NCI-H295R 人腎上腺皮質(zhì)腺癌細胞

細胞具體情況介紹：

細胞名稱(chēng)                       NCI-H295R 人腎上腺皮質(zhì)腺癌細胞

來(lái)源                              ATCC細胞庫

種屬                              人

組織                              腎

生長(cháng)特性                        半懸浮半貼壁

成瘤情況                       未成瘤

建議使用培養基             

龍躍細胞庫簡(jiǎn)介：

我公司自有高品質(zhì)進(jìn)口來(lái)源細胞庫， 所有細胞來(lái)源為進(jìn)口母細胞， 經(jīng)過(guò)永生化處理制成傳代細胞株， 保證為國內高品質(zhì)傳代細胞株。

另外我們有專(zhuān)門(mén)的工程師負責售后維護工作， 保證您購買(mǎi)細胞沒(méi)有后顧之憂(yōu)，  如果對細胞品質(zhì)不滿(mǎn)意可以無(wú)條件退款或免費重新發(fā)貨，直到滿(mǎn)意為止。

 細胞處理方法

以下細胞處理方法及細胞說(shuō)明書(shū)僅供參考，具體操作還需要根據到貨時(shí)細胞密度，細胞生長(cháng)狀態(tài)等具體情況，酌情處理，如需要更詳細技術(shù)指導，請及時(shí)電話(huà)或郵件聯(lián)系。

一．貼壁細胞

1. 客戶(hù)接收到細胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過(guò)的）培養瓶外部。
2. 肉眼觀(guān)察細胞培養基顏色，顯微鏡觀(guān)察細胞生長(cháng)情況，并對細胞進(jìn)行不同倍數拍照（建議收到時(shí)的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細胞100X ,200X 各一張）。
3. 顯微鏡觀(guān)察細胞，當細胞融匯80%左右（可以傳代的情況下），細胞應該在37度培養箱預溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度，培養瓶應預留一部分培養基繼續培養。
4. 嚴格無(wú)菌操作，打開(kāi)細胞培養瓶。
5. 將細胞培養瓶?jì)鹊呐囵B基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
6. 用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀(guān)察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
7. 1000rpm,5min離心，重懸細胞。換新的細胞培養瓶，37℃,5%CO₂  培養。

二．懸浮細胞

1. 接收到細胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過(guò)的）培養瓶外部。

2. 肉眼觀(guān)察細胞培養基顏色，顯微鏡觀(guān)察細胞生長(cháng)情況，并對細胞進(jìn)行不同倍數拍照（建議收到時(shí)的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細胞100X ,200X 各一張）。

3. 嚴格無(wú)菌操作，打開(kāi)細胞培養瓶。

4. 將細胞培養瓶?jì)鹊呐囵B基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒）。

5. 1000rpm,5min離心，重懸細胞。 換新的細胞培養瓶和新鮮培養基，37℃,5%CO₂  培養

維修 PCR/酶標儀/所有實(shí)驗室儀器

我公司維修站目前國內有上海和北京兩個(gè)站點(diǎn)  （ 北京和上?？梢耘蓪?zhuān)人上門(mén)檢測儀器并運往維修站， 也可以發(fā)快遞我公司 ）， 免費檢查，  找到問(wèn)題后報價(jià)維修， 如果報價(jià)后您覺(jué)得價(jià)格高的話(huà)可以不修（我們負責把機器原樣寄回）

實(shí)驗室儀器維修， 包括PCR， 酶標儀， 離心機，分析儀器，天平，水分計等

從事維修工作的工程師有長(cháng)達20年的工作經(jīng)驗，  可勝任幾乎所有常規實(shí)驗室儀器的維修及校準等工作， 大熒光定量PCR， DNA測序儀，小到水分計都可以維修

細胞培養小課堂 

細胞培養（cell culture）是指在體外模擬體內環(huán)境（無(wú)菌、適宜溫度、酸堿度和一定營(yíng)養條件等），使之生存、生長(cháng)、繁殖并維持主要結構和功能的一種方法。細胞培養也叫細胞克隆技術(shù)，在生物學(xué)中的正規名詞為細胞培養技術(shù)。不論對于整個(gè)生物工程技術(shù)，還是其中之一的生物克隆技術(shù)來(lái)說(shuō)，細胞培養都是一個(gè)*的過(guò)程，細胞培養本身就是細胞的大規?？寺?。細胞培養技術(shù)可以由一個(gè)細胞經(jīng)過(guò)大量培養成為簡(jiǎn)單的單細胞或極少分化的多細胞，這是克隆技術(shù)*的環(huán)節，而且細胞培養本身就是細胞的克隆。細胞培養技術(shù)是細胞生物學(xué)研究方法中重要和常用技術(shù)，通過(guò)細胞培養既可以獲得大量細胞，又可以借此研究細胞的信號轉導、細胞的合成代謝、細胞的生長(cháng)增殖等。

注意事項

編輯

（1）*次開(kāi)始培養某種細胞時(shí)，一定要用該細胞的名稱(chēng)進(jìn)行檢索，可以得到關(guān)于該細胞的詳細信息，包括需要使用的培養基、血清、添加劑、通常的消化時(shí)間、傳代時(shí)間等。對于特定的細胞（如原代培養的細胞），需要查閱相關(guān)文獻來(lái)獲得更準確的培養方法。

（2）進(jìn)入細胞間開(kāi)始細胞培養時(shí)，必須嚴格按照下列步驟操作：

①確定所有的細胞操作用的溶液和耗材都已經(jīng)消毒并檢測沒(méi)有問(wèn)題，不確定的溶液和耗材請勿使用，除非特殊情況，不要借用別人的溶液。

②確定衣服的袖口已經(jīng)卷起或者白大褂的袖口已經(jīng)扎緊。

③確定酒精燈內的酒精量，需要的話(huà)及時(shí)進(jìn)行補充。

④確定所有需要用到的溶液和耗材都放在伸手可及的位置。為了方便單手開(kāi)啟瓶蓋，實(shí)驗開(kāi)始前可以把所有瓶蓋旋松。

⑤盡量不要直接傾倒溶液，除非瓶口沒(méi)有被燒壞。如果傾倒失敗，溶液粘在瓶口，請用噴過(guò)75%酒精的紙巾仔細清潔瓶口周?chē)ú灰佑|到瓶口）后在火焰上簡(jiǎn)單燒灼。

⑥操作時(shí)如果不能肯定所用的耗材是潔凈的，必須及時(shí)更換。

⑦實(shí)驗完畢及時(shí)收拾，保持工作區域清潔整齊，后用75%酒精清潔臺面。

（3）細胞污染的預防

①實(shí)驗用品防止污染。細胞培養所用試劑、耗材、器材的清洗、消毒要*，各種溶液滅菌要仔細，并在無(wú)菌實(shí)驗檢測陰性后才能使用。操作室及剩余的無(wú)菌器材要定期清潔、消毒、滅菌。

②操作過(guò)程防止污染。

③穿著(zhù)容易起靜電或吸附灰塵的衣物必須更換為白大褂后才能進(jìn)入細胞間。

④實(shí)驗開(kāi)始前需要確定戴的手套沒(méi)有問(wèn)題，只要接觸過(guò)生物安全柜之外的物品，必須及時(shí)對手套進(jìn)行消毒。

⑤進(jìn)入細胞培養間后關(guān)好門(mén)，坐下來(lái)盡量少走動(dòng)以免影響生物安全柜的風(fēng)簾。工作開(kāi)始前要先用75%酒精棉球擦手和瓶蓋。事先要嚴格檢查所用的器材、溶液和細胞，不要把污染品或未經(jīng)消毒的物品帶入無(wú)菌室內，更不能隨便使用，以免造成大規模污染。

⑥細胞操作時(shí)動(dòng)作要輕，必須在火焰周?chē)鸁o(wú)菌區內打開(kāi)瓶口，并將瓶口放在火焰周?chē)?jiǎn)單轉動(dòng)燒灼，注意不要讓火焰把塑料瓶口燒化。

⑦實(shí)驗操作時(shí)生物安全柜的隔板要盡可能放低，盡量減少談話(huà)，打噴嚏或咳嗽時(shí)不能對著(zhù)工作區，以免造成不必要的污染。

⑧瓶蓋應當倒放在遠離自己的地方，以避免瓶蓋被誤操作所污染。

⑨不要從敞開(kāi)的容器口上方經(jīng)過(guò)，以避免衣服上掉落不明物體對細胞的污染。

⑩實(shí)驗操作時(shí)要注意及時(shí)更換巴斯德吸管、移液槍槍頭和移液管，切勿一根管子做到底。一旦發(fā)現接觸了非潔凈或者無(wú)法確定潔凈的物品必須直接丟棄。實(shí)驗完畢應及時(shí)收拾，保持實(shí)驗室清潔整齊，后用75%酒精清潔臺面。

（4）防止細胞交叉污染

①在進(jìn)行多種細胞培養操作時(shí)，所用器具要嚴格區分，作上標記便于辨別。按順序進(jìn)行操作，一次只處理一種細胞，多種細胞多種操作一起進(jìn)行時(shí)易發(fā)生t昆亂。

②在進(jìn)行換液或傳代操作時(shí)，粘有細胞的移液槍頭和移液管不要觸及試劑瓶瓶口，以免把細胞帶到培養基中污染其他細胞。

③所有細胞一旦購置，或從別處引入，或自己建立，必須及時(shí)保種凍存，一旦發(fā)生污染可重新復蘇細胞，繼續培養