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本文嘗試從用戶(hù)實(shí)際使用的角度,探討應該如何看待花樣繁多的參數特性,希望能幫助大家找到真正合適自己的ELX800 酶標儀。
一、濾片Vs光柵
ELX800 酶標儀的分類(lèi)方法眾多,但簡(jiǎn)單的莫過(guò)于用他們的濾光方式來(lái)作分界線(xiàn)。一般來(lái)說(shuō),可以分為濾光片型和光柵型兩大類(lèi)。當然也有一些型號,例如Synergy4和EnVision等,一臺機器里面同時(shí)裝上了濾光片和光柵。但是濾片和光柵并不能同時(shí)完成同一個(gè)檢測,還是想用光柵的時(shí)候用光柵,該用濾片的時(shí)候用濾片;還有一些實(shí)驗非用其中一個(gè)不可,另一模塊實(shí)現不了的。所以這類(lèi)儀器本質(zhì)上還只是把濾片和光柵放在了一起,并沒(méi)有使兩者糅合而產(chǎn)生新的技術(shù)突破。
總體來(lái)說(shuō),濾片技術(shù)由于發(fā)展已久,配合二向色鏡(其實(shí)也就是另一模式的濾光反光濾鏡)等光路系統,可以實(shí)現大部分實(shí)驗的需要。目前常規ELX800 酶標儀中高的檢測靈敏度就是用濾光片型做出來(lái)的,例如TECANInfiniteF500的熒光檢測的靈敏度可以達到0.04fmol/孔(熒光素,384孔/80ul)。但是濾光片型儀器由于受限于濾片的波長(cháng)和數量限制,不可能滿(mǎn)足日益增加的實(shí)驗類(lèi)型的檢測需要,而且有時(shí)需要對物質(zhì)的吸收、激發(fā)和發(fā)射光譜進(jìn)行研究,所以后來(lái)就誕生了光柵型的儀器。
先推出光柵的是MD公司,其光柵習慣上稱(chēng)為單光柵。由于光純度的不足,在光柵的后面又加入了一組帶阻濾片,再把雜光過(guò)濾一遍,達到了5×10-4的雜光率,基本與純粹的濾光片系統一致。后來(lái)TECAN又發(fā)展出了雙光柵技術(shù),通過(guò)兩次光柵濾光,雜光率降到了10-6。后來(lái),Thermo、BioTek和PE的部分新款儀器等都使用了類(lèi)似雙光柵技術(shù)。由于激發(fā)和發(fā)射各用了一組雙光柵,此類(lèi)機器又被稱(chēng)為四光柵型ELX800 酶標儀。
光柵型ELX800 酶標儀的推陳出新,使得用戶(hù)在波長(cháng)選擇上不再受限,而且在雜光率、帶寬控制等性能上還超越了濾光片系統。例如,TECAN公司在2008年底推出使用了第三代四光柵系統的ELX800 酶標儀,雜光率降到了2×10-7的新低,還實(shí)現了帶寬2.5~20nm連續可調。這些都是目前濾光片型ELX800 酶標儀所不能或者較難實(shí)現的。
二、雜光率&波長(cháng)準確性
光柵型濾光系統儼然已經(jīng)成為了目前通用性多功能ELX800 酶標儀的主流,多家廠(chǎng)家共同努力,已經(jīng)把光柵技術(shù)推到了歷史新高。在光柵的眾多技術(shù)參數之中,關(guān)鍵的無(wú)疑就是光柵的雜光率和波長(cháng)選擇的準確性了。
雜光率指得就是光源通過(guò)光柵后,得到的光線(xiàn)中,“不需要”的波長(cháng)的光占所標稱(chēng)波長(cháng)的光的比例,表征了濾光的純度。由于光線(xiàn)干涉、衍射等的復雜性,無(wú)論使用濾光片還是光柵,雜光都是不可避免的。各種濾光技術(shù)的本質(zhì)就是要想辦法把雜光盡可能地去掉。一般來(lái)說(shuō),濾光片型的雜光率在10-4~10-5之間,光柵型的可以做到10-6~10-7。由于此類(lèi)雜光是非特異的,而且會(huì )直接進(jìn)入后的檢測器,所以有多少的雜光就會(huì )引入多少的隨機誤差。在熒光等檢測過(guò)程中,由于檢測器存在放大效應,雜光率的干擾也會(huì )被指數級放大。因此,雜光率就是一個(gè)濾光系統的要性能指標。
光柵的另一個(gè)重要指標就是波長(cháng)選擇的準確性。因為很多檢測是依賴(lài)于物質(zhì)在某個(gè)波長(cháng)的特征圖譜。就像DNA/RNA的OD260濃度測定,實(shí)際檢測波長(cháng)偏離260nm幾個(gè)nm以上的話(huà),OD值與終濃度之間的數學(xué)關(guān)系就會(huì )發(fā)生改變。因此,一組性能優(yōu)良的光柵系統,他的波長(cháng)選擇準確性應該是在±0.5~1nm之間。波長(cháng)偏離過(guò)大有時(shí)就會(huì )影響到終結果的準確性。
這兩個(gè)可謂是光柵甚濾光片濾光系統關(guān)鍵的技術(shù)參數,直接影響到的是得到數據是否是真正所要測量的結果,是實(shí)驗結果可靠性的基本要求
三、品牌與售后
不同品牌的儀器往往性能側重點(diǎn)有所不用。例如,PE公司由于在試劑領(lǐng)域有較深底蘊,他們的ELX800 酶標儀在配合使用他們的TRF系列檢測試劑盒上作了多項優(yōu)化,因此PE的ELX800 酶標儀普遍來(lái)說(shuō)在TRF領(lǐng)域會(huì )有較多的特色功能和相對較高的性能指標。而像TECAN,就把研發(fā)的重點(diǎn)放在了四光柵的研究方面,近年來(lái)相繼推出了第二和第三代光柵型多功能ELX800 酶標儀,成為四光柵ELX800 酶標儀領(lǐng)域的*。而像多功能ELX800 酶標儀上加入比色杯、微量檢測板等功能也是TECAN從用戶(hù)角度考慮作出的技術(shù)創(chuàng )新,后來(lái)此類(lèi)技術(shù)都成為了Thermo、BioTek等品牌紛紛仿效的對象。
后,無(wú)論是一臺多好的ELX800 酶標儀,脫離了良好的售后服務(wù)體系也是難以正常運作的。今年,各家廠(chǎng)商都在中國國內設立了辦事處甚亞太區總部,有些產(chǎn)品還專(zhuān)門(mén)研發(fā)了中文版的軟件和說(shuō)明書(shū)。這都說(shuō)明了廠(chǎng)家對中國市場(chǎng)的重視。而正因為這種重視,無(wú)論是*還是選擇代理分銷(xiāo),都會(huì )對國內的售后服務(wù)提出各自的要求和期望,基本的就是普及儀器的應用工程師和維修工程師網(wǎng)絡(luò )體系。
可以說(shuō),國內的各大城市里面,基本已經(jīng)做到了部分品牌總有一個(gè)工程師在你身邊。選購之前多與工程師交流,充分了解各家的性能特長(cháng)和售后情況,反復對比,總能找到自己需要的一款多功能ELX800 酶標儀。北京龍躍生物科技發(fā)展有限公司主要經(jīng)營(yíng):艾本德5810R離心機,艾本德5804R離心機,艾本德5430R離心機,艾本德5424R離心機,艾本德5417R離心機
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